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生化試劑盒和elisa試劑盒的差異

更新時間:2024-05-08      點擊次數(shù):1040

今天來和大家總結一下生化試劑盒和elisa試劑盒的差異。最主要的還是兩者的原理問題。那么下面我們一起來看看吧!

一、檢測原理:

1、ELISA試劑盒檢測原理

ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯y(tǒng)i 烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法(圖A)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖B)等等。

抗體的特異性產(chǎn)生是由于抗原決定簇決定,抗體產(chǎn)生的過程也比較復雜,特別是小分子抗原必須偶聯(lián)到載體蛋白上才能產(chǎn)生抗體。

ELISA測定結果的表現(xiàn)形式:

物質濃度:單位主要是μg/mL。

2、生化試劑盒檢測原理

生化試劑盒檢測的本質就是某物質化學變化的顯色反應,其反應過程可以劃分為四個區(qū):延遲區(qū)、等速區(qū)、過渡區(qū)和平衡區(qū),以時間為橫坐標、吸光度為縱坐標作圖。

延遲區(qū):無規(guī)律可尋。

等速區(qū):對應的是速率法,一般應用于酶活力的檢測。

過渡區(qū):對應的是固定時間法,目的是解決某些化學反應的非特異性問題,提高準確度。

平衡區(qū):對應的是終點法,主要是測定某物質在樣本中的含量。

目前,我公司的生化試劑盒采用的原理為:可見區(qū)的顯色反應和紫外區(qū)的某一物質變化量。某物質與顯色劑反應后,形成區(qū)別于自身的顏色反應,在某一波長下,吸光度的強弱與物質的含量呈正比關系。

生化測定結果的表現(xiàn)形式:

① 物質濃度:單位主要是mg/L、mmol/L、μmol/mgprot等

② 某種能力和活力:世界上沒有真實物質存在,以另一真實存在的物質變化量來表示其能力大小;其單位為U/L、U/gprot等。例如酶活的單位:在特定條件下,每分鐘內(nèi)轉化1 μmol底物的酶量為一個單位(U),或者轉化1 μmol的有關基團的酶量。

二、從微觀角度來看

某一物質的抗原決定簇的活性位點(或者抗原抗體特異性結合位點),與化學反應的活性位點可能存在差異。

生化試劑盒和ELISA試劑盒的檢測結果趨勢是正相關、負相關還是不相關的問題,需要更高技術設備和方法,以及大量的實驗數(shù)據(jù)來驗證。從原理中也說明了ELISA試劑盒分種屬,而生化試劑盒不分種屬的問題。


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